view in publisher's site

Increased 3’‐phosphoadenosine‐5’‐phosphosulfate levels in engineered Escherichia coli cell lysate facilitates in vitro synthesis of Chondroitin Sulfate A

Abstract Chondroitin sulfates (CS) are linear glycosaminoglycans that have important applications in the medical and food industries. Engineering bacteria for microbial production of CS will facilitate the one‐step, scalable production with good control over sulfation levels and positions in contrast to extraction from animal sources. Advancing towards this goal, we engineered E. coli to accumulate 3’‐phosphoadenosine‐5’‐phosphosulfate (PAPS), the universal sulfate donor, using traditional metabolic engineering approaches. PAPS is one of the least explored components required for biosynthesis of CS. The resulting engineered E. coli strain shows a ~1000‐fold increase in intracellular PAPS concentrations. This study also reports, for the first time, in vitro biotransformation of CS using PAPS, chondroitin and chondroitin‐4‐sulfotransferase (C4ST) all synthesized from different engineered E. coli strains made in our laboratory. We show a 10.4‐fold increase in the amount of CS produced by biotransformation by employing PAPS from the engineered PAPS‐accumulating strain. The data from the biotransformation experiments also help us evaluate reaction components that need improved production to achieve a one‐ step microbial synthesis of CS. This would provide a new platform to produce CS. This article is protected by copyright. All rights reserved.

افزایش ۳ "- phosphoadenosine - ۵" - phosphosulfate در سلول‌های مهندسی شده اشرشیا کلی، سنتز درون شیشه‌ای of Sulfate A را تسهیل می‌کند.

چکیده sulfates chondroitin (CS)glycosaminoglycans خطی هستند که کاربردهای مهمی در صنایع غذایی و غذایی دارند. باکتری‌های مهندسی برای تولید میکروبی CS، تولید مقیاس پذیر را با کنترل خوب نسبت به سطوح sulfation و موقعیت‌ها در تقابل با استخراج از منابع حیوانی تسهیل خواهد کرد. پیش از رسیدن به این هدف، ما را مهندسی کردیم. coli به منظور تجمع ۳ "- phosphoadenosine - ۵" - phosphosulfate (paps)، دهنده سولفات دار، با استفاده از روش‌های سنتی مهندسی متابولیک مورد بررسی قرار گرفت. paps (paps)یکی از حداقل اجزا مورد نیاز برای بیوسنتز CS است. در نتیجه E. نتیجه‌گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که سویه e. coli با افزایش غلظت paps داخل سلولی افزایش می‌یابد. این مطالعه همچنین گزارش می‌دهد که برای اولین بار در شرایط درون شیشه‌ای CS با استفاده از paps، chondroitin و chondroitin - ۴ - sulfotransferase (C۴ST)همگی از ای های مهندسی شده مختلف سنتز شدند. coli انجام شد. ما یک افزایش ۱۰ برابر در مقدار CS تولید شده توسط biotransformation با استفاده از paps از سویه paps مهندسی شده نشان می‌دهیم. داده‌های حاصل از آزمایش‌ها biotransformation همچنین به ما کمک می‌کنند تا اجزای واکنش که به تولید بهبود یافته برای دستیابی به یک سنتز میکروبی یک مرحله‌ای از CS نیاز دارند را ارزیابی کنیم. این یک پلت فرم جدید برای تولید CS فراهم می‌کند. این مقاله توسط کپی‌رایت مورد حمایت قرار می‌گیرد. تمام حقوق محفوظ است.

ترجمه شده با

Download PDF سفارش ترجمه این مقاله این مقاله را خودتان با کمک ترجمه کنید
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.