view in publisher's site

Analysis of CLCNKB mutations at dimer‐interface, calcium‐binding site, and pore reveals a variety of functional alterations in ClC‐Kb channel leading to Bartter syndrome

Abstract Pathological missense mutations in CLCNKB gene give a wide spectrum of clinical phenotypes in Bartter syndrome type III patients. Molecular analysis of the mutated ClC‐Kb channels can be helpful to classify the mutations according to their functional alteration. We investigated the functional consequences of nine mutations in the CLCNKB gene causing Bartter syndrome. We first established that all tested mutations lead to decreased ClC‐Kb currents. Combining electrophysiological and biochemical methods in Xenopus laevis oocytes and in MDCKII cells, we identified three classes of mutations. One class is characterized by altered channel trafficking. p.A210V, p.P216L, p.G424R, and p.G437R are totally or partially retained in the endoplasmic reticulum. p.S218N is characterized by reduced channel insertion at the plasma membrane and altered pH‐sensitivity; thus, it falls in the second class of mutations. Finally, we found a novel class of functionally inactivated mutants normally present at the plasma membrane. Indeed, we found that p.A204T alters the pH‐sensitivity, p.A254V abolishes the calcium‐sensitivity. p.G219C and p.G465R are probably partially inactive at the plasma membrane. In conclusion, most pathogenic mutants accumulate partly or totally in intracellular compartments, but some mutants are normally present at the membrane surface and simultaneously show a large range of altered channel gating properties.

تحلیل CLCNKB جهش در دایمر - رابط، محل اتصال کلسیم، و منافذ، انواع تغییرات عملکردی را در کانال ClC - Kb نشان می‌دهد که منجر به سندروم بارتر می‌شود.

چکیده جهش‌های سو حس آسیب‌شناسی در ژن CLCNKB طیف گسترده‌ای از فنوتیپ‌های بالینی را در بیماران مبتلا به سندرم بارتر نوع III می‌دهد. آنالیز مولکولی کانال‌های جهش یافته ClC - Kb می‌تواند برای طبقه‌بندی جهش‌ها با توجه به تغییر عملکردی آن‌ها مفید باشد. ما نتایج عملکردی نه جهش در ژن CLCNKB عامل سندرم بارتر را بررسی کردیم. ما ابتدا ثابت کردیم که تمام جهش‌های تست شده منجر به کاهش جریان‌های ClC - Kb می‌شوند. با ترکیب روش‌های الکتروفیزیولوژی و بیوشیمیایی در اووسیت های Xenopus laevis و در سلول‌های MDCKII، ما سه دسته از جهش‌ها را شناسایی کردیم. یک کلاس با قاچاق تغییر یافته کانال مشخص می‌شود. p. A۲۱۰V، p. ، p. G۴۲۴R، and p. G۴۳۷R به طور کامل یا جزئی در شبکه اندو پلاسمیک حفظ می‌شود. p. S۲۱۸N با کاهش درج کانال در غشا پلاسما و تغییر حساسیت PH مشخص می‌شود؛ بنابراین در دومین کلاس از جهش‌ها قرار می‌گیرد. در نهایت، ما کلاس جدیدی از جهش‌یافته‌های عملکردی غیرفعال را یافتیم که به طور معمول در غشای پلاسما حضور دارند. در واقع، ما متوجه شدیم که p. A۲۰۴T حساسیت pH را تغییر می‌دهد، p. A۲۵۴V حساسیت کلسیم را از بین می‌برد. p. G۲۱۹C و p. G۴۶۵R احتمالا تا حدی در غشا پلاسما غیر فعال است. در نتیجه، بیشتر جهش‌یافته‌های بیماری زا تا حدودی یا به طور کامل در بخش‌های داخل سلولی تجمع می‌یابند، اما برخی جهش‌یافته‌ها معمولا در سطح غشا حضور دارند و به طور همزمان طیف وسیعی از ویژگی‌های کانال تغییر یافته را نشان می‌دهند.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Genetics
  • ترجمه مقاله Genetics
  • مقاله ژنتیک
  • ترجمه مقاله ژنتیک
  • مقاله Genetics(clinical)
  • ترجمه مقاله Genetics(clinical)
  • مقاله ژنتیک (بالینی)
  • ترجمه مقاله ژنتیک (بالینی)
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.