view in publisher's site

Effects of Cell Concentration on Viability and Metabolic Activity during Cryopreservation

Increasing the cell concentration during the cryopreservation of red blood cells (RBC) increased hemolysis. Similarly, increasing the cell concentration during the cryopreservation of hepatocytes reduced both the viability of the cells as assessed by trypan blue exclusion and the metabolic activity of the trypan blue-excluding cells. In both cell types, significant damage appeared at cell concentration levels exceeding 60%. With tightly packed RBC, hemolysis reached 63%, while for hepatocytes after thawing and dilution, trypan blue viability was reduced to 41% of that of the cells initially isolated. The viability of cryopreserved hepatocytes, estimated by trypan blue exclusion, was considerably reduced following incubation for 1 h at 37°C and the extent of this reduction was also a function of cell concentration during freezing and thawing. The trypan blue viability of hepatocytes that were tightly packed during cryopreservation and then incubated at a concentration of 5 × 106viable cells/ml fell dramatically to only 12.5%. The protein-synthesizing activity and the membrane transport activity of these cells, expressed in terms of cells that excluded trypan blue immediately following thawing and removal of the cryoprotectant, were reduced to 38.7 and 33.5%, respectively, of the activity in cells that were packed at 10% cell concentration. The fall in metabolic activity may have been due to complete loss of activity in some of the cells or reduced activity in most or all of the cells or any combination of these factors. It is concluded that there may be many mechanisms involved, but the most important factor is probably stresses produced by unphysiological cell–cell contacts occurring during the freeze–thaw cycle.

اثرات تمرکز سلولی بر روی قابلیت زنده ماندن و فعالیت متابولیکی در طول کریوپستراسیون

افزایش غلظت سلول در طول انجماد گلبول‌های قرمز خون (RBC)، همولیز را افزایش داد. به طور مشابه، افزایش غلظت سلول در طول انجماد هپاتوسیت ها، هم قابلیت حیات سلول‌ها را همانطور که توسط محرومیت آبی تریپان و هم فعالیت متابولیک سلول‌های محرومیت آبی تریپان ارزیابی شد، کاهش داد. در هر دو نوع سلول، آسیب قابل‌توجهی در سطوح غلظت سلول بیش از ۶۰ % ظاهر شد. با RBC فشرده، همولیز به ۶۳ % رسید، در حالی که برای سلول‌های کبدی پس از ذوب و رقیق‌سازی، زنده بودن تریپان بلو به ۴۱ % از سلول‌های جدا شده اولیه کاهش یافت. زنده ماندن هپاتوسیت های منجمد شده، که با حذف تریپان بلو تخمین زده می‌شود، به طور قابل‌توجهی پس از انکوباسیون به مدت ۱ ساعت در ۳۷ درجه سانتی گراد کاهش یافت و وسعت این کاهش نیز تابعی از غلظت سلول در طول انجماد و ذوب شدن بود. زنده ماندن تریپان بلو سلول‌های کبدی که در طول انجماد محکم بسته شده‌بودند و سپس در غلظت ۵ * ۱۰۶ سلول زنده در میلی‌لیتر انکوبه شدند، به طور چشمگیری تنها به ۱۲.۵ % کاهش یافت. فعالیت ترکیب پروتئین و فعالیت انتقال غشا این سلول‌ها، از نظر سلول‌هایی که تریپان بلو را بلافاصله پس از ذوب و حذف محافظ سرما حذف کردند، به ترتیب به ۳۸.۷ و ۳۳.۵ درصد از فعالیت در سلول‌هایی که در غلظت ۱۰ درصد سلول بسته‌بندی شده‌بودند، کاهش یافت. کاهش در فعالیت متابولیک ممکن است به دلیل از دست دادن کامل فعالیت در برخی از سلول‌ها یا کاهش فعالیت در اکثر یا همه سلول‌ها یا هر ترکیبی از این عوامل باشد. می توان نتیجه گرفت که ممکن است مکانیسم‌های زیادی دخیل باشند، اما مهم‌ترین عامل احتمالا تنش‌های ناشی از تماس‌های سلول - سلول غیر فیزیولوژیکی است که در طول چرخه انجماد - ذوب اتفاق می‌افتد.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله General Biochemistry, Genetics and Molecular Biology
  • ترجمه مقاله General Biochemistry, Genetics and Molecular Biology
  • مقاله بیوشیمی، ژنتیک و زیست‌شناسی مولکولی عمومی
  • ترجمه مقاله بیوشیمی، ژنتیک و زیست‌شناسی مولکولی عمومی
  • مقاله General Medicine
  • ترجمه مقاله General Medicine
  • مقاله طب عمومی
  • ترجمه مقاله طب عمومی
  • مقاله General Agricultural and Biological Sciences
  • ترجمه مقاله General Agricultural and Biological Sciences
  • مقاله علوم کشاورزی و زیستی عمومی
  • ترجمه مقاله علوم کشاورزی و زیستی عمومی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.