view in publisher's site

Isolation and partial characterization of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) gill mucin

Gill mucin from rainbow trout was isolated utilizing two rounds of cesium chloride density ultracentrifugation followed by gel filtration on Sepharose CL-2B. Neither density ultracentrifugation nor gel filtration alone was sufficient for purification of the mucin. Isolated gill mucin had a density of 1.5 g/ml and eluted at the void volume of the Sepharose CL-2B column. Silver-stained reducing 6% polyacrylamide gel electrophoresis of gill mucin produced a band at the origin with a smear entering the separating gel. There was no evidence of a link protein in gill mucin on reducing 12% polyacrylamide gel electrophoresis. Gill mucin had an amino acid profile similar to that of mucins in other species. Specifically, 35.1% of the total amino acids were represented by threonine and serine, while another 27.5% were alanine and proline. Gill mucin contained galactose (26.7 ± 3.2%), galactosamine (22.5 ± 4.4%), glucose (16.6 ± 8.7%), fucose (16.1 ± 1.5%), glucosamine (12.0 ± 1.9%) and mannose (5.1 ± 4.4%). Uronic acid levels from purified mucin were very low (0.7 ± 0.1%). Sialic acid was also present (0.06 g/g of mucin protein). The periodic acid-Schiff assay routinely utilized for detection of mucins was relatively insensitive for detection of gill mucin (6 × less sensitive than for pig gastric mucin) so a rabbit antiserum was raised. The antiserum produced profiles similar to the periodic acid-Schiff assay of fractions following gel filtration. Immunofluorescence of formalin-fixed rainbow trout gill tissue sections showed that the antiserum detected mucin within branchial goblet cells.

جداسازی و شناسایی نسبی ماهی قزل آلای رنگین‌کمان (< تاکید Type = > / تاکید >)mucin آبشش

mucin Gill از قزل آلای رنگین‌کمان با استفاده از دو دور از اولتراسانتریفوژ تراکم کلرید سزیم جدا شد و بعد از آن ژل فیلتراسیون روی sepharose CL - ۲ B قرار گرفت. نه ultracentrifugation چگالی و نه ژل فیلتراسیون به تنهایی برای خالص‌سازی موسین کافی بود. موسین gill ایزوله شده دارای چگالی ۱.۵ g / ml و از ستون خارج از ستون of - ۲ B بود. ژل نقره رنگ‌آمیزی شده با نقره ۶ درصد ژل پلی آکریل آمید را بر روی موسین اسیدی ایجاد کرده و در حال وارد شدن به ژل جدا کننده بود. هیچ مدرکی دال بر وجود یک پروتئین پیوندی در موسین های آبشش وجود نداشت و بر روی ژل پلی آکریل آمید ۱۲ درصد الکتروفورز شد. Gill یک پروفیل اسید آمینه مشابه با mucins در سایر گونه‌ها داشت. به طور خاص، ۳۵.۱ درصد از کل اسیده‌ای آمینه توسط ترئونین و سرین نشان داده شد، در حالی که ۲۷.۵ درصد دیگر آلانین و پرولین بودند. Gill دارای گالاکتوز (۲۶.۷ ± ۳.۲ درصد)، قند (۱۶.۶ ± ۴.۴ درصد)، قند انتهایی فوکوز (۱۶.۱ ± ۱.۵ درصد)، glucosamine (۱۲.۰ ± ۱.۹ درصد)و مانوز (۵.۱ ± ۴.۴ درصد)بود. میزان اسید uronic در موسین های تخلیص شده بسیار پایین بود (۰.۱ ± ۰.۷ %). sialic اسید نیز وجود داشت (۰.۰۶ گرم بر گرم پروتئین موسین). روش متناوب اسید - Schiff به طور معمول برای تشخیص of برای تشخیص موسین های آبشش (۶ * کم‌تر از موسین gastric)مورد استفاده قرار گرفت، بنابراین آنتی سرم خرگوشی ایجاد شد. آنتی سرم profiles مشابه با سنجش متناوب اسید - Schiff فراکشن های بعد از ژل فیلتراسیون است. بررسی مقاطع بافتی آبشش ماهی قزل آلای رنگین‌کمان ثابت شده در فرمالین نشان داد که این آنتی سرم در درون سلول‌های جامی branchial ایجاد شده بود.

ترجمه شده با

Download PDF سفارش ترجمه این مقاله این مقاله را خودتان با کمک ترجمه کنید
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.