view in publisher's site

Biosynthesis of D-danshensu from L-DOPA using engineered Escherichia coli whole cells

D-Danshensu (D-DSS), a traditional Chinese medicine, is used to treat cardiovascular and cerebrovascular diseases. However, current isolation protocols for D-DSS both natural and synthetic are not ideal; therefore, in this study, we have developed a whole-cell biotransformation method to produce D-DSS from L-DOPA. This was done by co-expressing L-amino acid deaminase (aadL), D-lactate dehydrogenase (ldhD), and glucose dehydrogenase (gdh). To begin to optimize the production of D-DSS, varying copy number plasmids were used to express each of the required genes. The resulting strain, Escherichia coli ALG7, which strongly overexpressed aadL, ldhD, and weakly overexpressed gdh, yielded a 378% increase in D-DSS production compared to E. coli ALG1. Furthermore, the optimal reaction conditions for the production of D-DSS were found to be a pH of 7.5, temperature at 35 °C, and 50 g/L wet cells for 12 h. Under these optimized conditions, the D-DSS amount achieved 119.1 mM with an excellent ee (> 99.9%) and a productivity of 9.9 mM/h.

Biosynthesis D - danshensu از L - DOPA با استفاده از نوع تاکید < مهندسی " = Escherichia coli / تاکید بر کل سلول‌ها

D- Danshensu (D - DSS)یک داروی سنتی چینی است که برای درمان بیماری‌های قلبی عروقی و عروقی مغز استفاده می‌شود. با این حال، پروتکل‌های جداسازی کنونی برای D - DSS هم طبیعی و هم مصنوعی ایده‌آل نیستند؛ بنابراین، در این مطالعه، ما یک روش biotransformation سلول کامل برای تولید D - DSS از L - DOPA ایجاد کرده‌ایم. این کار با بیان آنزیم دآمیناز، دی لاکتات دهیدروژناز (aadL)، دی لاکتات دهیدروژناز (ldhD)و گلوکز دهیدروژناز (gdh)انجام شد. برای شروع به بهینه‌سازی تولید D - DSS، از چندین پلاسمید مختلف برای بیان هر یک از ژن‌های مورد نیاز استفاده شد. نژاد حاصل، اشرشیا کلی ALG۷، که به شدت aadL، ldhD، و با افزایش بیان مفرط gdh، به میزان ۳۷۸ درصد افزایش در تولید D - DSS در مقایسه با E. coli ALG۱ شناسایی شد. علاوه بر این، شرایط بهینه واکنش برای تولید D - DSS نیز به ترتیب PH ۷.۵، دمای ۳۵ درجه سانتیگراد و ۵۰ گرم در لیتر سلول‌های مرطوب برای ۱۲ ساعت یافت شد. تحت این شرایط بهینه، مقدار D - DSS با مقدار ee عالی (> % %)و بهره‌وری ۹.۹ میلی متر بر ساعت به ۱۱۹.۱ میلی متر رسید.

ترجمه شده با

Download PDF سفارش ترجمه این مقاله این مقاله را خودتان با کمک ترجمه کنید
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.