view in publisher's site

Improvement of alkaline protease production by Penicillium chrysogenum NRRL 792 through physical and chemical mutation, optimization, characterization and genetic variation between mutant and wild-type strains

Penicillium chrysogenum NRRL 792 was exposed successively to gamma radiation (physical mutagen) and ethyl methansulfonate (EMS; chemical mutagen). Gamma mutant G9 produced more alkaline protease than the wild type (62.92 vs. 40.0 U/g, respectively). Subsequent mutagenesis of G9 by EMS resulted in mutant EMS-1, which produced the highest level of enzyme (120.0 U/g). Optimal conditions for alkaline protease production by this mutant fungal strain were examined. The optimized medium was supplemented with 1 % (w/w) casein and 2.5 mM MgSO4, while the optimal pH and temperature were 9, and 30 °C after 7 days of incubation. The purified mutant alkaline protease from EMS-1 was more stable than that from the wild-type, resulting in the former having a higher pH stability and thermostability. The mutant and wild enzymes were subjected to sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. The purified mutant enzyme showed two bands with molecular weights of 40 and 65 kDa, while the molecular weight of the purified wild-type enzyme was 66 kDa. Random amplified polymorphic DNA and inter-simple sequence repeat markers were used to identify polymorphism and genetic variations between the mutant and wild-type strains.

بهبود تولید پروتئاز قلیایی از طریق جهش فیزیکی و شیمیایی، بهینه‌سازی، خصوصیات و تنوع ژنتیکی بین گونه‌های جهش‌یافته و نوع وحشی.

Penicillium chrysogenum NRRL ۷۹۲ به طور متوالی در معرض اشعه گاما (mutagen فیزیکی)و اتیل methansulfonate (EMS، mutagen شیمیایی)قرار گرفت. mutant گاما آمینو protease protease بیشتری نسبت به نوع وحشی تولید می‌کند (۶۲.۹۲ در مقابل. (به ترتیب ۴۰.۰ U / g، به ترتیب). اصلاح بعدی of توسط EMS، منجر به عوض کردن ام اس ای - ۱ شد، که بالاترین سطح آنزیم را تولید کرد (۱۲۰.۰ U / g). شرایط مطلوب برای تولید protease قلیایی با این نوع جهش قارچی مورد بررسی قرار گرفت. محیط بهینه با ۱ % (w / w)casein و ۲.۵ mM MgSO۴ تکمیل شد در حالی که pH و دمای بهینه ۹ و ۳۰ درجه سانتی گراد پس از ۷ روز انکوبه شدند. پروتئاز قلیایی قلیایی از EMS - ۱ از نوع وحشی پایدارتر بود، که منجر به داشتن ثبات pH بالاتر و thermostability شد. این آنزیم‌ها و آنزیم‌های wild در معرض الکتروفورز ژل سدیم dodecylsulfate - polyacrylamide قرار گرفتند. آنزیم جهش‌یافته خالص دو باند با وزن مولکولی ۴۰ و ۶۵ کیلو دالتون را نشان داد، در حالی که وزن مولکولی آنزیم نوع وحشی خالص ۶۶ کیلو دالتون بود. DNA به صورت تصادفی، DNA پلی مورفیک و توالی درون - ساده را تکرار کرد تا پلی مورفیسم و تغییرات ژنتیکی بین گونه‌های جهش‌یافته و نوع وحشی را شناسایی کند.
ترجمه شده با

سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.