view in publisher's site

An LC-MRM assay for the quantification of metanephrines from dried blood spots for the diagnosis of pheochromocytomas and paragangliomas

Highlights•Development and validation of an assay for metanephrines from dried blood spots.•Method utilizes on-spot derivatization followed by LC/MRM-MS based quantitation.•Method demonstrated high degree of sensitivity, precision, and accuracy.•High relevance for the clinical diagnosis of pheochromocytomas and paragangliomas.AbstractThe quantitation of metanephrine (MN), normetanephrine (NMN), and 3-methoxytyramine (3MT) – referred to as metanephrines -- by LC-MS/MS is the gold-standard for screening for pheochromocytoma and paragangliomas (PPGLs), tumors of the adrenal gland and the peripheral nervous system. An assay for metanephrines from dried blood spots (DBSs) would be of high clinical utility as it simplifies sample collection, enables remote sampling, and could increase compliance with the clinical recommendation for supine sampling. Moreover, DBS sampling facilitates the measurement of blood-derived metanephrines in pediatric patients – where DBSs are well-established – in order to diagnose neuroblastomas.Here, we adapted an established derivatization-based LC-MRM-MS assay for plasma catecholamines, and optimized the sample extraction, LC, and MS parameters to produce a fast, sensitive, and robust method for the measurement of metanephrines from DBSs, including 3-methoxytyramine. The DBS samples were excised, derivatized with phenyl isothiocyanate (PITC) on-spot, extracted, and measured by LC-MRM-MS. To validate assay suitability and performance, we assessed the linearity, precision, accuracy, recovery, and matrix effects of the method, and determined the stability of metanephrines in DBSs under different storage conditions. Assay performance for NMN, MN, and 3MT was sufficient for quantitation from a single DBS within a linear range from 40 – 2000 pg/mL MN and NMN were stable in DBSs for 2 weeks, whereas 3MT was stable for one week regardless of storage temperature. Altogether, this work represents the first quantitative LC-MS/MS method for metanephrines from DBSs and provides a novel opportunity for the diagnosis of PPGLs and neuroblastomas in the future.Graphical abstractDownload : Download high-res image (173KB)Download : Download full-size image

یک سنجش LC - MRM برای quantification of از لکه‌های خون خشک‌شده برای تشخیص of و paragangliomas

کاره‌ای مهم: توسعه و اعتبار سنجی سنجش برای metanephrines از نقاط خون خشک‌شده. روش مورد استفاده در derivatization نقطه به دنبال by مبتنی بر LC / MRM - MS بکار می‌رود. روش، درجه بالایی از حساسیت، دقت و دقت را نشان می‌دهد. ارتباط بالا برای تشخیص بالینی of و paragangliomas.Abst ractThe quantitation (MN، normetanephrine (NMN)، و ۳ - methoxytyramine (۳ MT)- به عنوان metanephrines - توسط LC - MS / MS برای غربالگری برای pheochromocytoma و paragangliomas (PPGLs)، تومورهای غده آدرنالی و سیستم عصبی محیطی استفاده می‌شود. یک سنجش برای metanephrines از نقاط خون خشک‌شده (DBSs)از کاربرد بالینی بالایی برخوردار است چون جمع‌آوری نمونه را ساده می‌کند، نمونه‌گیری از راه دور را ممکن می‌سازد و می‌تواند سازگاری با توصیه بالینی برای نمونه‌گیری سست و سست را افزایش دهد. علاوه بر این، نمونه‌گیری DBS اندازه‌گیری of مشتق‌شده از خون در بیماران خردسال را تسهیل می‌کند - که در آن DBSs برای تشخیص neuroblastomas.Here، یک سنجش established - MRM - MS برای پلاسما plasma، و پارامترهای استخراج نمونه، LC، و MS را برای تولید یک روش سریع، حساس و قوی برای اندازه‌گیری of از DBSs، شامل ۳ - methoxytyramine، سازگار کردیم. نمونه‌های DBS were، derivatized با فنیل isothiocyanate (PITC)روی نقطه، استخراج‌شده، و توسط MS - MRM اندازه‌گیری شدند. برای تایید مناسب بودن و عملکرد ارزیابی، ما میزان خطی بودن، دقت، دقت، بهبود، و اثرات ماتریس را ارزیابی کردیم و پایداری of در DBSs تحت شرایط ذخیره مختلف را تعیین کردیم. عملکرد Assay برای NMN، MN، و ۳ MT برای quantitation از یک DBS واحد در محدوده خطی از ۴۰ تا ۲۰۰۰ pg و NMN برای ۲ هفته ثابت بود، در حالی که ۳ ترجمه ماشینی برای یک هفته بدون در نظر گرفتن درجه‌حرارت انبار ثابت بود. روی هم رفته این کار اولین روش کمی LC / MS / MS را برای metanephrines از DBSs ارایه می‌دهد و یک فرصت جدید برای تشخیص PPGLs و neuroblastomas در the hical abstractDownload ارایه می‌دهد: تصویر high (۱۷۳ کیلوبایت)دانلود کنید: تصویر متن کامل دانلود کنید.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Environmental Chemistry
  • ترجمه مقاله Environmental Chemistry
  • مقاله شیمی محیط‌‌ زیست
  • ترجمه مقاله شیمی محیط‌‌ زیست
  • مقاله Analytical Chemistry
  • ترجمه مقاله Analytical Chemistry
  • مقاله شیمی تجزیه
  • ترجمه مقاله شیمی تجزیه
  • مقاله Biochemistry
  • ترجمه مقاله Biochemistry
  • مقاله بیوشیمی
  • ترجمه مقاله بیوشیمی
  • مقاله Spectroscopy
  • ترجمه مقاله Spectroscopy
  • مقاله اسپکتروسکوپی
  • ترجمه مقاله اسپکتروسکوپی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.