view in publisher's site

Viral fitness of MHV-68 viruses harboring drug resistance mutations in the protein kinase or thymidine kinase

Highlights•MHV-68 PK and TK resistance mutations reduce phenotypic susceptibility to drugs in-class.•Loss of MHV-68 PK function but not of TK function leads to reduced viral replication capacity.•PK and TK mutations differently modulate viral fitness in the presence of antivirals.•Relative fitness and drug resistance levels positively correlate for MHV-68 TK and PK loss of function mutants.•Cellular and/or viral factors other than drug-pressure may contribute to fitness of MHV-68 missense TK mutants.AbstractMurine γ-herpesvirus-68 (MHV-68), genetically and biologically related to human γ-herpesviruses Epstein-Barr virus and Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus, can be easily propagated in vitro allowing drug resistance studies. Previously, we described specific changes in MHV-68 protein kinase (PK) or thymidine kinase (TK) associated with resistance to various purine or pyrimidine nucleoside analogues, respectively.To investigate how specific TK and PK mutations affect viral replication capacity, we performed dual infection competition assays in which wild-type and drug-resistant virus compete in absence or presence of antivirals in Vero cells. The composition of the mixed viral population was analyzed using next-generation sequencing and relative fitness of seven MHV-68 PK or TK mutants was calculated based on the frequency of viral variants at the time of infection and after 5-days growth.A MHV-68 mutant losing the PK function due to a 2-nucleotide deletion was less fit than the wild-type virus in absence of antivirals, consistent with the essential role of viral PKs during lytic replication, but overgrew the wild-type virus under pressure of purine nucleosides. TK mutant viruses, with frameshift or missense mutations, grew equal to wild-type virus in absence of antivirals, in accordance with the viral TK function only being essential in non-replicating or in TK-deficient cells, but were more fit when treated with pyrimidine nucleosides. Moreover, TK missense mutant viruses also increased fitness under pressure of antivirals other than pyrimidine nucleosides, indicating that MHV-68 TK mutations might influence viral fitness by acting on cellular and/or viral functions that are unrelated to nucleoside activation.

تناسب ویروسی ویروس‌های MHV - ۶۸ دارای جهش‌های مقاومت دارویی در پروتیین کیناز یا تیمیدین کیناز

نقاط برجسته جهش‌های مقاومت MHV - ۶۸ PK و TK حساسیت فنوتیپی به داروها را در کلاس کاهش می‌دهند. از دست دادن تابع MHV - ۶۸ PK اما نه از تابع TK منجر به کاهش ظرفیت تکثیر ویروس می‌شود. جهش‌های PK و TK تناسب ویروسی را در حضور آنتی ونوم ها به طور متفاوت تعدیل می‌کنند. تناسب نسبی و سطوح مقاومت دارویی ارتباط مثبتی با MHV - ۶۸ TK و از دست دادن PK جهش‌یافته‌های تابع دارند. عوامل سلولی و / یا ویروسی به غیر از فشار دارو ممکن است به تناسب MHV - ۶۸ جهش بد معنی TK کمک کند. قبلا، ما تغییرات خاص در پروتیین کیناز MHV - ۶۸ یا تیمیدین کیناز (TK)مرتبط با مقاومت در برابر آنالوگ‌های نوکلئوزیدی مختلف پورین یا پیریمیدین را به ترتیب شرح دادیم. برای بررسی اینکه چگونه جهش‌های خاص TK و PK بر ظرفیت تکثیر ویروس تاثیر می‌گذارند، ما سنجش عفونت دوگانه انجام دادیم که در آن ویروس نوع وحشی و مقاوم به دارو در غیاب یا حضور آنتی ونوم در سلول‌های Vero رقابت می‌کند. ترکیب جمعیت ویروسی مخلوط با استفاده از تعیین توالی نسل بعدی و تناسب نسبی هفت جهش MHV - ۶۸ PK یا TK براساس فراوانی انواع ویروسی در زمان عفونت و پس از رشد ۵ روزه محاسبه شد. یک جهش MHV - ۶۸ عملکرد PK را به دلیل حذف ۲ - نوکلیوتیدی از ویروس نوع وحشی در غیاب آنتی ویروس‌ها از دست داد، که با نقش ضروری PKs ویروسی در طول تکثیر لیتیک سازگار بود، اما ویروس نوع وحشی را تحت فشار نوکلئوزید های پورین رشد داد. ویروس‌های جهش‌یافته TK، با جهش‌های framesانده یا سو حس، در غیاب آنتی ویروس‌ها، برابر با ویروس نوع وحشی رشد کردند، مطابق با عملکرد ویروس TK تنها در سلول‌های فاقد تکثیر یا در سلول‌های دارای نقص TK ضروری بودند، اما وقتی با نوکلئوزید پیریمیدین درمان شدند تناسب بیشتری داشتند. علاوه بر این، ویروس‌های جهش‌یافته MHV - ۶۸ TK نیز آمادگی را تحت فشار ضدویروس به غیر از نوکلئوزید پیریمیدین افزایش می‌دهند، که نشان می‌دهد جهش‌های MHV - ۶۸ TK ممکن است با عمل بر روی سلول و / یا عملکردهای ویروسی که به فعال‌سازی نوکلئوزید ارتباطی ندارند، بر آمادگی ویروسی تاثیر بگذارند.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Pharmacology
  • ترجمه مقاله Pharmacology
  • مقاله داروسازی
  • ترجمه مقاله داروسازی
  • مقاله Virology
  • ترجمه مقاله Virology
  • مقاله ویروس‌شناسی
  • ترجمه مقاله ویروس‌شناسی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.