view in publisher's site

Cryopreservation of coho salmon sperm (Oncorhynchus kisutch): Effect on sperm function, oxidative stress and fertilizing capacity

Highlights•None of the extenders had negative effect on sperm motility during the equilibrium period.•The post-thaw sperm motility was significantly affected by CPA-I, CPA-E and their interaction.•Cryopreservation significant increased the lipid peroxidation and living spermatozoa producing O⁠2⁠•−.•DMSO at 8 to 10% with glucose 0.18 M yielded fertility rates around 30.0%.AbstractSperm cryopreservation is an important tool for reproductive management; however, it has not been possible to perform this procedure for coho salmon. This study was designed to assess the effect of cryopreservation on sperm functional parameters, oxidative stress markers and fertilizing capacity of coho salmon. Eight extenders were tested, consisting of two intracellular cryoprotectant agents (CPA-I): dimethylsulfoxide (DMSO) at 8 and 10% and methanol (MeOH) at 9 and 12%, two extracellular cryoprotectants (CPA-E): 0.14 M trehalose and 0.18 M glucose, supplemented in all cases with 10% egg yolk and Storfish®. Milt samples from 18 males were evaluated in three trials. In the first trial, the toxic effect of cryoprotectants on motility was evaluated after 0, 15, 30, and 60 min of equilibration time. The second trial was conducted to select the extender which produced the best post-thaw sperm motility. In both trials, sperm motility was analysed by a subjective method. In the third trial, milt samples were frozen in the three best extenders; post-thawed samples were assessed for motility by computer-assisted sperm analysis CASA, viability, superoxide anion production (O⁠2⁠•−), mitochondrial membrane potential (ΔΨm) by flow cytometry, lipid peroxidation (malondialdehyde, MDA) and fertilizing capacity were also analysed. In Trial 1, no negative effect of the extenders tested was observed on sperm motility during the different equilibration times. In Trial 2, the post-thaw sperm motility was significantly affected by CPA-I, CPA-E and their interaction, in other words, the protection capacity was dependent on the type of CPA-I and at the same time on the CPA-E. Thus, the best results were obtained with DMSO combined with glucose, with mean motility of 16.44 ± 12.55% (8% DMSO + glucose) and 11.57 ± 10.23% (10% DMSO + glucose). In Trial 3, all the sperm parameters were significantly affected after freezing. Mean post-thaw sperm motility varied from 20.50 ± 15.83% to 35.80 ± 17.64%, cell viability ranged from 56.23 ± 11.05% to 59.42 ± 12.00% and the ΔΨm varied from 12.50 ± 8.9% to 14.63 ± 10.09%, without significant differences between the three extenders assessed in this trial. On other hand, the percentage of living spermatozoa producing O⁠2⁠•− and the MDA levels increased significantly after freezing, which suggests that sperm cryodamage was caused in part by oxidative stress. The combination of either 8% or 10% DMSO with glucose yielded the best fertility rates (30.00 ± 11.73% and 31.00 ± 10.25% respectively). In conclusion, DMSO in combination with glucose and hen egg yolk is the most suitable extender for preserving the sperm quality and fertilizing capacity of coho salmon.

کریوپافت اسپرم ماهی قزل آلای coho (Oncorhynchus کیچ): اثر بر عملکرد اسپرم، استرس اکسیداتیو و ظرفیت باروری

نکات برجسته: هیچ یک از رقیق‌کننده‌ها اثر منفی بر حرکت اسپرم در طول دوره تعادل نداشتند. * حرکت اسپرم پس از ذوب شدن به طور قابل‌توجهی تحت‌تاثیر CPA - I، CPA - E و اثر متقابل آن‌ها قرار گرفت. * کریوپستراسیون به طور قابل‌توجهی پراکسیداسیون لیپید و اسپرم زنده تولید کننده O۲ * - را افزایش داد. DMSO در ۸ تا ۱۰ % با گلوکز ۰.۱۸ M نرخ‌های باروری را در حدود ۳۰ % نتیجه داد. انجماد سر اسپرم یک ابزار مهم برای مدیریت تولید مثل است؛ با این حال امکان انجام این روش برای ماهی آزاد coho وجود ندارد. این مطالعه به منظور بررسی تاثیر انجماد بر پارامترهای عملکردی اسپرم، مارکرهای استرس اکسیداتیو و ظرفیت باروری ماهی آزاد coho طرح‌ریزی شده‌است. هشت رقیق‌کننده‌ها مورد آزمایش قرار گرفتند، که شامل دو عامل ضد یخ داخل سلولی (CPA - I)بودند: دی متیل سولفوکسید (DMSO)در ۸ و ۱۰ درصد و متانول (MeOH)در ۹ و ۱۲ درصد، دو ضد یخ خارج سلولی (CPA - E): ۰.۱۴ M ترهالوز و ۰.۱۸ M گلوکز، که در همه موارد با زرده تخم‌مرغ و استوفیش ۱۰ درصد مکمل شده بودند. نمونه‌های شیر ۱۸ مرد در سه آزمایش مورد ارزیابی قرار گرفتند. در آزمایش اول، اثر سمی ضد یخ بر تحرک پس از ۰، ۱۵، ۳۰ و ۶۰ دقیقه زمان تعادل ارزیابی شد. آزمایش دوم برای انتخاب رقیق‌کننده انجام شد که بهترین حرکت اسپرم پس از ذوب را تولید کرد. در هر دو آزمایش، حرکت اسپرم با یک روش ذهنی آنالیز شد. در آزمایش سوم، نمونه‌های میلت در سه بهترین رقیق‌کننده‌ها منجمد شدند؛ نمونه‌های پس از ذوب برای تحرک با آنالیز اسپرم به کمک کامپیوتر کاسا، زنده بودن، تولید آنیون سوپراکسید (O۲ * -)، پتانسیل غشای میتوکندری (ΔH [ ۲ ] m)با فلوسایتومتری، پراکسیداسیون چربی (مالون دی آلدئید، MDA)و ظرفیت باروری نیز مورد بررسی قرار گرفتند. در آزمایش ۱، هیچ اثر منفی از رقیق‌کننده‌های تست شده بر روی حرکت اسپرم در طول زمان‌های تعادل مختلف مشاهده نشد. در آزمایش ۲، تحرک اسپرم پس از ذوب شدن به طور قابل‌توجهی تحت‌تاثیر CPA - I، CPA - E و اثر متقابل آن‌ها قرار گرفت، به عبارت دیگر، ظرفیت حفاظت به نوع CPA - I و در همان زمان به CPA - E وابسته بود. بنابراین، بهترین نتایج با ترکیب DMSO با گلوکز، با میانگین حرکت ۱۶.۴۴ ± ۱۲.۵۵ % (۸ % DMSO + گلوکز)و ۱۱.۵۷ ± ۱۰.۲۳ % (۱۰ % DMSO + گلوکز)به دست آمد. در آزمایش ۳، تمام پارامترهای اسپرم به طور قابل‌توجهی بعد از انجماد تحت‌تاثیر قرار گرفتند. میانگین درصد تحرک اسپرم پس از ذوب از ۲۰.۵۰ ± ۱۵.۸۳ درصد تا ۳۵.۸۰ ± ۱۷.۶۴ درصد، میانگین درصد زنده ماندن سلول‌ها از ۵۶.۲۳ ± ۱۱.۰۵ درصد تا ۵۹.۴۲ ± ۱۲.۰۰ درصد و میانگین دامنه دامنه دامنه دامنه دامنه دامنه تغییرات از ۱۲.۵۰ ± ۸.۹ درصد تا ۱۴.۶۳ ± ۱۰.۰۹ درصد بود. از سوی دیگر، درصد اسپرم‌های زنده تولید کننده O۲ * - و سطوح MDA به طور قابل‌توجهی پس از انجماد افزایش یافت، که نشان می‌دهد که آسیب به کرایو اسپرم تا حدی ناشی از استرس اکسیداتیو بود. ترکیب ۸ % یا ۱۰ % DMSO با گلوکز بهترین نرخ‌های باروری را به همراه داشت (به ترتیب ۳۰.۰۰ ± ۱۱.۷۳ % و ۳۱.۰۰ ± ۱۰.۲۵ %). در نتیجه DMSO در ترکیب با گلوکز و زرده تخم‌مرغ بهترین رقیق‌کننده برای حفظ کیفیت اسپرم و ظرفیت باروری ماهی آزاد coho است.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Aquatic Science
  • ترجمه مقاله Aquatic Science
  • مقاله علوم آبی
  • ترجمه مقاله علوم آبی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.