view in publisher's site

A competitive enzyme linked aptasensor with rolling circle amplification (ELARCA) assay for colorimetric detection of Listeria monocytogenes

Highlights•An ELARCA assay was developed for L. monocytogenes detection.•The LOD for L. monocytogenes was 102 CFU/mL in pure culture and 103 CFU/g in spiked lettuce.•The ELARCA method provided a platform for other pathogenic bacteria.AbstractListeria monocytogenes (L. monocytogenes) is a foodborne pathogen which can cause significant threats to human health, thus, a highly specific and accurate method for detection in food is urgently needed. In this study, an enzyme-linked aptasensor with rolling circle amplification (ELARCA) assay was developed for the sensitive and specific detection of L. monocytogenes. The assay was based on the competition between the aptamer (that was specific for L. monocytogenes) that was bound to the biotin probe 1 (BP1~A) and the RCA probe that was complementary to the BP1. Addition of the bacteria released the BP1 making it available for the RCA probe which initiated the RCA process. In the presence of the RCA buffer, multiple copies of the DNA were formed which attached the biotin probe 3 (BP3). The biotin in BP3 interacted with streptavidin labeled with horse radish peroxidase (SA-HRP) to complete the assay complex. In the presence of the enzyme substrate, HRP produced a chromophore that led to the colorimetric detection. Under the optimal conditions, the ELARCA assay for L. monocytogenes showed a limit of detection (LOD) of 4.6 × 102 CFU/mL in pure culture, which was three orders of magnitude higher than without RCA. The ELARCA assay in spiked fresh lettuce showed an LOD of 6.1 × 103 CFU/g. The method developed was fast, low-cost, sensitive, and highly specific for L. monocytogenes. By changing the specificity of the aptamer, the proposed ELARCA method provided a potential platform for the detection of other pathogenic bacteria.

یک آنزیم رقابتی متصل به aptasensor حلقه circle rolling amplification (ELARCA)detection colorimetric colorimetric of of of of of of of of of of of of of of of of of of of of of of of of of Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria Listeria

کاره‌ای مهم: یک سنجش ELARCA برای L ایجاد شد. تشخیص monocytogenes ۱۰۰ LOD برای L. monocytogenes ۱۰۲ CFU / میلی‌لیتر در فرهنگ خالص و ۱۰۳ CFU / g در کاهو spiked بود. روش ELARCA پلت فرم برای دیگر pathogenic ractListeria pathogenic ((L. monocytogenes یک پاتوژن foodborne است که می‌تواند منجر به تهدیدهای جدی برای سلامت انسان شود در نتیجه یک روش بسیار دقیق و دقیق برای تشخیص مواد غذایی ضروری است. در این مطالعه، یک aptasensor متصل به آنزیم با سنجش چرخه دایره‌ای (ELARCA)برای تشخیص دقیق و خاص L توسعه داده شد. monocytogenes سنجش براساس رقابت بین آپتامر (که مختص L بود)بود. monocytogenes (monocytogenes)که به the biotin ۱ (bp۱)و the (س ا ر)بسته شده‌بود که مکمل the بود. اضافه شدن باکتری‌ها، bp۱ را آزاد کرد که آن را برای کاوشگر (س ا ر)که فرآیند (س ا ر)را آغاز می‌کرد، در دسترس قرار داد. در حضور بافر (س ا ر)، چندین کپی از DNA تشکیل شد که the biotin ۳ (BP۳)را وصل کرد. The در BP۳ با streptavidin که با horse radish horse (SA - HRP)تعامل دارند تا مجتمع سنجش را تکمیل کنند. در حضور سوبسترا آنزیمی، HRP یک chromophore تولید کرد که منجر به کشف colorimetric شد. تحت شرایط بهینه، سنجش ELARCA برای L. monocytogenes نشان داد که حد تشخیص (LOD)۶ ر ۶ CFU / میلی‌لیتر در فرهنگ خالص را نشان می‌دهد، که سه مرتبه بیشتر از (آر سی ای)بود. سنجش ELARCA در کاهو جدید، یک LOD ۶.۱ * ۱۰۳ CFU / g را نشان داد. روش توسعه‌یافته سریع، کم‌هزینه، حساس، و بسیار ویژه برای L. monocytogenes با تغییر ویژگی آپتامر، روش ELARCA پیشنهادی یک پلت فرم پتانسیل برای تشخیص باکتری‌های بیماری زا دیگر فراهم کرد.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Food Science
  • ترجمه مقاله Food Science
  • مقاله علوم غذایی
  • ترجمه مقاله علوم غذایی
  • مقاله Biotechnology
  • ترجمه مقاله Biotechnology
  • مقاله بیوتکنولوژی
  • ترجمه مقاله بیوتکنولوژی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.