view in publisher's site

HPLC-UV analytical validation of a method for quantification of progesterone in ex vivo trans-corneal and trans-scleral diffusion studies

Highlights•Progesterone is stable when stored at 4° or −80° for up to 7 days.•Validation of highly sensitive HPLC method for determination of progesterone.•Progesterone administered in b-cyclodextrins ex vivo diffuses through eye membranes.AbstractProgesterone (PG) diminishes free radical damage and thus can afford protection against oxidative stress affecting the retina. The therapeutic use of PG is limited because it is a highly hydrophobic steroid hormone with very low solubility in water. This is the main drawback for the therapeutic application of PG at ocular level. The aims of this study were: (i) to analyze if PG causes ocular irritation (ii) to validate a HPLC method to determine PG in ex vivo studies and (iii) to evaluate PG permeation through cornea and sclera. A high performance liquid chromatographic method was developed and validated to detect PG incorporated to β-cyclodextrin using a Waters Sunfire C18 (150 × 4.6 mm) reverse-phase column packed with 5 μm silica particles using a mobile phase consisted of a mixture of acetonitrile (ACN) and pure water 80:20 (v/v), pH 7.4. The limit of detection and the limit of quantification for 50 μL injection of PG were found to be 0.42 and 1.26 μg/mL, respectively. The calibration curve showed excellent linearity over the concentration range (0.5 μg/mL to 100 μg/mL). As proof of concept, ex-vivo experiments to investigate PG permeation through cornea and sclera with vertical diffusion cells were carried out to quantify PG diffusion. Ex vivo experiments demonstrate its applicability to investigate permeation levels of PG from 6.57 ± 0.37 μg/cm2 at cornea and 8.13 ± 0.85 μg/cm2 sclera. In addition, at the end of diffusion studies the amount of PG retained in each tissue was also quantified, and it was 40.87 ± 9.84 μg/cm2 (mean ± SD; n = 6) in cornea and 56.11 ± 16.67 μg/cm2 (mean ± SD; n = 6) in sclera.

اعتبارسنجی تحلیلی HPLC - UV روشی برای کمی سازی پروژسترون در مطالعات نفوذی فرا قرنیه و فرا صلبیه در شرایط آزمایشگاهی

نکات برجسته: پروجسترون زمانی که در ۴ درجه و یا ۸۰ - درجه به مدت ۷ روز نگهداری می‌شود، پایدار است. * اعتبار سنجی روش بسیار حساس HPLC برای تعیین پروژسترون. واکنش پروگسترون (PG)آسیب رادیکال آزاد را کاهش می‌دهد و بنابراین می‌تواند در برابر استرس اکسیداتیو موثر بر شبکیه محافظت شود. استفاده درمانی از PG محدود است چون یک هورمون استروئیدی بسیار آبگریز با حلالیت بسیار پایین در آب است. این مشکل اصلی کاربرد درمانی PG در سطح چشم است. اهداف این مطالعه عبارتند از: (۱)آنالیز اینکه آیا PG باعث تحریک چشمی می‌شود یا خیر (۲)تایید روش HPLC برای تعیین PG در مطالعات خارج از بدن و (۳)ارزیابی نفوذ PG از قرنیه و صلبیه. یک روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا برای شناسایی PG ترکیب‌شده با β - سیکلودکسترین با استفاده از یک ستون فاز معکوس C۱۸ (۱۵۰ * ۴.۶ mm)با ذرات سیلیکا ۵ μm با استفاده از یک فاز متحرک شامل ترکیبی از استونیتریل (ACN)و آب خالص ۸۰: ۲۰ (v / v)، pH ۷.۴. حد تشخیص و حد تعیین برای ۵۰ میکرولیتر از تزریق ۴۲ / ۰ میکروگرم بدست آمد. منحنی کالیبراسیون، خطی بودن عالی را در محدوده غلظت نشان داد (۰.۵ μg / ml تا ۱۰۰ μg / ml). به عنوان اثبات مفهوم، آزمایش‌ها خارج از بدن برای بررسی نفوذ PG در قرنیه و صلبیه با سلول‌های نفوذ عمودی برای تعیین کمیت نفوذ PG انجام شد. آزمایش‌ها in vivo قابلیت آن را برای بررسی سطوح نفوذ PG از ۶.۵۷ ± ۰.۳۷ μg / cm۲ در قرنیه و ۸.۱۳ ± ۰.۸۵ μg / cm۲ صلبیه نشان می‌دهد. علاوه بر این، در پایان مطالعات انتشار، مقدار PG باقی مانده در هر بافت نیز کمی شد و در صلبیه ۴۰.۸۷ ± ۹.۸۴ μg / cm۲ (mean ± SD؛ n = ۶)و در قرنیه ۵۶.۱۱ ± ۱۶.۶۷ μg / cm۲ (mean ± SD؛ n = ۶)بود.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Pharmaceutical Science
  • ترجمه مقاله Pharmaceutical Science
  • مقاله علوم دارویی
  • ترجمه مقاله علوم دارویی
  • مقاله Drug Discovery
  • ترجمه مقاله Drug Discovery
  • مقاله کشف دارو
  • ترجمه مقاله کشف دارو
  • مقاله Clinical Biochemistry
  • ترجمه مقاله Clinical Biochemistry
  • مقاله بیوشیمی بالینی
  • ترجمه مقاله بیوشیمی بالینی
  • مقاله Spectroscopy
  • ترجمه مقاله Spectroscopy
  • مقاله اسپکتروسکوپی
  • ترجمه مقاله اسپکتروسکوپی
  • مقاله Analytical Chemistry
  • ترجمه مقاله Analytical Chemistry
  • مقاله شیمی تجزیه
  • ترجمه مقاله شیمی تجزیه
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.