view in publisher's site

Ovine oocytes display a similar germinal vesicle configuration and global DNA methylation at prepubertal and adult ages

Highlights•All prepubertal oocytes from ≥ 3 mm follicles present global DNA methylation.•Oocytes from prepubertal and adult ewes display similar germinal vesicle patterns.•Developmental competence is impair in prepubertal oocytes from ≥ 3 mm follicles.•Development to blastocyst was faster in oocytes from adults than in 3 months-old donors.AbstractEpigenetic mechanisms are thought to be involved in the reduced developmental capacity of early prepubertal ewe oocytes compared to their adult counterparts. In this study, we have analyzed the global DNA methylation pattern and in vitro meiotic and developmental competence of oocytes at the germinal vesicle (GV) stage obtained from adult and 3-month-old donors. All oocytes were aspirated from antral follicles with a diameter ≥3 mm, and DNA methylation on 5-methylcytosine was detected by immunofluorescence using an anti-methyl cytosine antibody. The main global chromatin configuration pattern shown by both prepubertal and adult ovine oocytes corresponded to condensed chromatin localized close to the nuclear envelope (the SNE pattern). Immunofluorescence showed that a global bright nuclear staining of 5-methylcytosine (5-mC) occurred in all germinal vesicle stage oocytes and matched the propidium iodide staining pattern. The total fluorescence intensity values of lamb GVs were not lower than those observed in adult GVs. The meiotic competence and cleavage rates were similar in adult and prepubertal oocytes, however, the developmental competence of embryos to reach blastocysts was higher for adult oocytes than lamb oocytes (p<0.0001). In conclusion, our results indicate that adult-size oocytes derived from 3 to 4 month old prepubertal ewes show similar GV morphology and DNA methylation staining patterns to those obtained from adult animals, despite exhibiting a lower developmental competence.

ovine oocytes یک پیکربندی vesicle مشابه و متیلاسیون DNA جهانی در سنین prepubertal و بزرگسالی را نشان می‌دهد.

کاره‌ای مهم: همه prepubertal oocytes از follicles ۳ mm در حال حاضر متیلاسیون DNA جهانی هستند. * از prepubertal و ewes بالغ الگوی vesicle مشابه را نمایش می‌دهند. * صلاحیت رشد در prepubertal oocytes از follicles ۳ mm اختلال ایجاد می‌کند. توسعه از بلاستوسیت نسبت به جنین‌های ۳ ماهه سریع‌تر بود - مکانیسم‌های ractEpigenetic donors.Abst old تصور می‌شود که در کاهش ظرفیت رشد of ewe prepubertal در مقایسه با همتایان بزرگ‌سال شان درگیر هستند. در این مطالعه، الگوی متیلاسیون DNA جهانی و در آزمایشگاه meiotic و صلاحیت توسعه of در مرحله germinal vesicle (GV)به‌دست‌آمده از اهدا کنندگان بالغ و ۳ ماهه را مورد بررسی قرار داده‌ایم. All were از follicles antral با قطر ۳ mm و متیلاسیون DNA در ۵ - methylcytosine توسط immunofluorescence با استفاده از آنتی‌بادی anti متیل methyl شناسایی شد. الگوی پیکربندی اصلی chromatin global که توسط prepubertal and و both adult نشان داده شد، با chromatin condensed که در نزدیکی پاکت هسته‌ای (الگوی SNE)محدود شده بود، مکاتبه داشتند. Immunofluorescence نشان داد که یک رنگ‌آمیزی هسته‌ای روشن جهانی ۵ - methylcytosine (۵ - mC)در تمام مراحل germinal vesicle رخ داد و با الگوی رنگ‌آمیزی یدید iodide هماهنگ شد. کل مقادیر تراکم فلوروسانس از بره GVs کم‌تر از مقادیر مشاهده‌شده در GVs بزرگسالان بود. صلاحیت meiotic و نرخ‌های تقسیم مشابه در adult بالغ و prepubertal oocytes بودند، با این حال، صلاحیت رشد جنین برای رسیدن به blastocysts برای بزرگسالان بالغ بالاتر از بره oocytes بود (p < ۰.۰۰۰۱). در نتیجه، نتایج ما نشان می‌دهد که oocytes سایز بزرگ از ۳ تا ۴ ماه ewes old old مشابه مورفولوژی GV و الگوهای رنگ‌آمیزی DNA مشابه را به آن‌هایی که از حیوانات بالغ به‌دست‌آمده بودند، نشان می‌دهد.
ترجمه شده با

Download PDF سفارش ترجمه این مقاله این مقاله را خودتان با کمک ترجمه کنید
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.