view in publisher's site

An in vitro comparison of venom recovery methods and results on the box jellyfish, Chironex fleckeri

Highlights•Venom extracted via ethanol had a different venom profile than bead mill extraction.•Venom extracted via ethanol lacked cardiotoxicity and repeatability.•Venom yield was lower in ethanol extracted venom.•Venom profile was less complex in ethanol extracted venom.AbstractThe emergence of novel venom extraction techniques over the last half-century has greatly facilitated advances in the field of cnidarian research. A new recovery protocol utilizing ethanol as the primary stimulant in nematocyst discharge was recently published, however in vitro examination of the venom on organic models was not performed. This present study reports an original comparison of the chemically-induced discharge technique in vitro with a commonly used saltwater extraction method. Size-exclusion chromatography revealed distinct differences in venom profiles between the two methods: the saltwater recovery method FPLC profile and SDS-PAGE gel were similar to previously published results, whereas the ethanol-induced method was not. SDS-PAGE gel revealed distinct 40–55 kDa bands of previously identified cardiotoxic proteins recovered from the saltwater method, whereas the ethanol-induced method yielded degraded venom protein bands. A concentration-response curve generated through xCELLigence Real-Time Cell Analysis (RTCA) revealed a dramatic decrease in human cardiomyocyte activity when venom recovered via saltwater discharge was applied to these cells. With the exception of one sample, all ethanol-induced recovered venom failed to prompt a concentration-dependent decrease in cell survival when applied to human cardiomyocytes, resulting in a significant difference in IC50 concentrations between the compared venom samples. The data presented here facilitates an improved understanding of the parameters and analyses that are essential when developing and utilizing novel techniques for future cnidarian venom extraction research and supports the conclusion that recovery of venom from the tentacles of the box jellyfish Chironex fleckeri by ethanol is not an effective, efficient, or comprehensive extraction method compared to the published method of saltwater degradation of tentacles and bead mill extraction.

مقایسه برون تنی روش‌های بازیابی زهر و نتایج آن بر روی عروس‌دریایی جعبه‌ای، Chironex fleckeri

نکات برجسته * استخراج ونوم از طریق اتانول دارای پروفایل زهر متفاوتی نسبت به استخراج از دانه‌های روغنی بود. ونوم استخراج‌شده از طریق اتانول فاقد سمیت قلبی و تکرار پذیری بود. بازده ونوم در اتانول استخراج‌شده از زهر کم‌تر بود. پروفایل زهر در اتانول استخراجی کم‌تر پیچیده بود. واکنش سریع ظهور تکنیک‌های جدید استخراج زهر در نیم‌قرن گذشته، پیشرفت در زمینه تحقیقات کنیداریان را تسهیل کرده‌است. یک پروتکل بازیابی جدید با استفاده از اتانول به عنوان محرک اصلی در تخلیه نماتوسیت اخیرا منتشر شده‌است، با این حال آزمایش برون تنی زهر بر روی مدل‌های آلی انجام نشد. این مطالعه یک مقایسه اصلی از تکنیک تخلیه شیمیایی در شرایط آزمایشگاهی با یک روش استخراج آب شور معمول گزارش می‌کند. کروماتوگرافی اندازه - حذف تفاوت‌های متمایزی را در پروفایل زهر بین دو روش نشان داد: روش بازیابی آب شور پروفایل FPLC و ژل SDS - PAGE مشابه نتایج منتشر شده قبلی بودند، در حالی که روش القا شده با اتانول نبود. ژل SDS - PAGE باندهای متمایز ۴۰ - ۵۵ کیلو دالتون از پروتئین‌های کاردیوتوکسیک شناخته‌شده قبلی بازیابی شده از روش آب شور را نشان داد، در حالی که روش القا شده با اتانول باندهای پروتئین سم تجزیه‌شده را به دست داد. منحنی غلظت - پاسخ تولید شده از طریق آنالیز سلول زمان واقعی xCELLigence (RTCA)یک کاهش چشمگیر در فعالیت کاردیومیوسیت های انسان زمانی که زهر بازیابی شده از طریق تخلیه آب شور به این سلول‌ها اعمال شد را نشان داد. به استثنای یک نمونه، همه سم بازیابی شده با اتانول در تسریع یک کاهش وابسته به غلظت در بقای سلول در هنگام اعمال به کاردیومیوسیت های انسانی شکست خورد، که منجر به تفاوت قابل‌توجهی در غلظت IC۵۰ بین نمونه‌های زهر مقایسه شده شد. داده‌های ارائه‌شده در اینجا، درک بهتری از پارامترها و تحلیل‌هایی که در زمان توسعه و استفاده از تکنیک‌های جدید برای تحقیقات آینده استخراج زهر کنیداریان ضروری هستند را تسهیل می‌کند و این نتیجه را پشتیبانی می‌کند که بازیابی زهر از شاخک‌های عروس‌دریایی جعبه، Chironex fleckeri توسط اتانول، یک روش استخراج موثر، کارآمد یا جامع در مقایسه با روش منتشر شده تجزیه شاخک‌ها و استخراج دانه‌های نمک نیست.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Toxicology
  • ترجمه مقاله Toxicology
  • مقاله سم‌شناسی
  • ترجمه مقاله سم‌شناسی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.