view in publisher's site

The Mercaptopyruvate Sulfurtransferase of Trichomonas vaginalis Links Cysteine Catabolism to the Production of Thioredoxin Persulfide

Abstract Trichomonas vaginalis is a protozoan parasite of humans that is able to synthesize cysteine de novo using cysteine synthase but does not produce glutathione. In this study, high pressure liquid chromatography analysis confirmed that cysteine is the major intracellular redox buffer by showing that T. vaginalis contains high levels of cysteine (∼600 μm) comprising more than 70% of the total thiols detected. To investigate possible mechanisms for the regulation of cysteine levels in T. vaginalis, we have characterized enzymes of the mercaptopyruvate pathway. This consists of an aspartate aminotransferase (TvAspAT1), which transaminates cysteine to form 3-mercaptopyruvate (3-MP), and mercaptopyruvate sulfurtransferase (TvMST), which transfers the sulfur of 3-MP to a nucleophilic acceptor, generating pyruvate. TvMST has high activity with 3-MP as a sulfur donor and can use several thiol compounds as sulfur acceptor substrates. Our analysis indicated that TvMST has a kcat/Km for reduced thioredoxin of 6.2 × 107 m−1 s−1, more than 100-fold higher than that observed for β-mercaptoethanol and cysteine, suggesting that thioredoxin is a preferred substrate for TvMST. Thiol trapping and mass spectrometry provided direct evidence for the formation of thioredoxin persulfide as a product of this reaction. The thioredoxin persulfide could serve a biological function such as the transfer of the persulfide to a target protein or the sequestered release of sulfide for biosynthesis. Changes in MST activity of T. vaginalis in response to variation in the supply of exogenous cysteine are suggestive of a role for the mercaptopyruvate pathway in the removal of excess intracellular cysteine, redox homeostasis, and antioxidant defense.

Persulfide The Sulfurtransferase Trichomonas vaginalis Links cysteine Catabolism to to Production Production Production Production Production Production of of of of of of of of of Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin Thioredoxin

چکیده Trichomonas vaginalis یک انگل protozoan از انسان است که قادر به تولید cysteine de با استفاده از synthase cysteine می‌باشد اما تولید glutathione را تولید نمی‌کند. در این مطالعه، آنالیز کروماتوگرافی مایع فشار بالا تایید شد. که از طریق نشان دادن T، buffer اصلی درون سلولی redox است. vaginalis شامل سطوح بالایی از cysteine (۶۰۰ میکرومتر)متشکل از بیش از ۷۰ % کل thiols شناسایی‌شده است. برای بررسی مکانیزم‌های ممکن برای the of سطوح T. با این حال، ما آنزیم‌های of mercaptopyruvate را مشخص کرده‌ایم. این شامل an aspartate (TvAspAT۱)است، که از cysteine cysteine به شکل ۳ - mercaptopyruvate (۳ - MP)و mercaptopyruvate sulfurtransferase (TvMST)، که نقل و انتقالات را انجام می‌دهد، گوگرد ۳ - MP برای جانشینی نوکلئوفیلی acceptor، pyruvate را تولید می‌کند. TvMST دارای فعالیت بالا با ۳ - MP به عنوان یک دهنده گوگرد است. می‌تواند از چندین ترکیب thiol به عنوان زیرلایه های سولفور استفاده کند. تجزیه و تحلیل ما نشان داد که TvMST یک kcat / Km برای کاهش thioredoxin ۲ - ۱ m - ۱ و بیش از ۱۰۰ برابر بیشتر از آنچه برای β - mercaptoethanol و cysteine مشاهده می‌شود دارد، که نشان می‌دهد که thioredoxin یک ترجیح داده می‌شود. زیر لایه برای TvMST. تله گذاری thiol و طیف‌سنجی جرمی مدرک مستقیمی برای تشکیل of persulfide ارایه کرد. به عنوان محصول این واکنش. The می‌تواند به عنوان یک تابع زیستی مانند انتقال of عمل کند. برای یک پروتئین هدف یا آزاد سازی sequestered سولفیدی برای biosynthesis. تغییرات در فعالیت MST T. vaginalis در پاسخ به تنوع در عرضه of exogenous نشان‌دهنده نقش در مسیر mercaptopyruvate است. حذف cysteine درون سلولی، homeostasis redox، homeostasis، و دفاع آنتی‌اکسیدان.

ترجمه شده با

Download PDF سفارش ترجمه این مقاله این مقاله را خودتان با کمک ترجمه کنید
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.