view in publisher's site

PEGylated human serum albumin (HSA) nanoparticles: preparation, characterization and quantification of the PEGylation extent

Nanotechnology. 2015 Apr 10;26(14):145103. doi: 10.1088/0957-4484/26/14/145103. Epub 2015 Mar 19.PEGylated human serum albumin (HSA) nanoparticles: preparation, characterization and quantification of the PEGylation extent.Fahrländer E1, Schelhaas S, Jacobs AH, Langer K.Author information1Institute of Pharmaceutical Technology and Biopharmacy, University of Muenster, Corrensstraße 48, D-48149 Münster, Germany.AbstractModification with poly(ethylene glycol) (PEG) is a widely used method for the prolongation of plasma half-life of colloidal carrier systems such as nanoparticles prepared from human serum albumin (HSA). However, the quantification of the PEGylation extent is still challenging. Moreover, the influence of different PEG derivatives, which are commonly used for nanoparticle conjugation, has not been investigated so far. The objective of the present study is to develop a method for the quantification of PEG and to monitor the influence of diverse PEG reagents on the amount of PEG linked to the surface of HSA nanoparticles. A size exclusion chromatography method with refractive index detection was established which enabled the quantification of unreacted PEG in the supernatant. The achieved results were confirmed using a fluorescent PEG derivative, which was detected by photometry and fluorimetry. Additionally, PEGylated HSA nanoparticles were enzymatically digested and the linked amount of fluorescently active PEG was directly determined. All the analytical methods confirmed that under optimized PEGylation conditions a PEGylation efficiency of up to 0.5 mg PEG per mg nanoparticle could be achieved. Model calculations made a 'brush' conformation of the PEG chains on the particle surface very likely. By incubating the nanoparticles with fetal bovine serum the reduced adsorption of serum proteins on PEGylated HSA nanoparticles compared to non-PEGylated HSA nanoparticles was demonstrated using sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Finally, the positive effect of PEGylation on plasma half-life was demonstrated in an in vivo study in mice. Compared to unmodified nanoparticles the PEGylation led to a four times larger plasma half-life.PMID: 25789544 DOI: 10.1088/0957-4484/26/14/145103 [Indexed for MEDLINE] ShareMeSH terms, SubstancesMeSH termsAnimalsCattleHumansMiceNanoparticles/chemistry*Particle SizePolyethylene Glycols/chemistry*Serum Albumin/chemistry*Serum Albumin, Bovine/chemistrySurface PropertiesSubstancesSerum AlbuminSerum Albumin, BovinePolyethylene GlycolsLinkOut - more resourcesFull Text SourcesIOP Publishing Ltd.

نانو ذرات آلبومین سرم انسانی pegylated (HSA): تهیه، شناسایی و تعیین مقدار آن

نانو تکنولوژی. ۲۰۱۵: ۱۰؛ ۲۶ (۱۴): ۱۴۵۱۰۳. doi: ۱۰.۱۰۸۸ / ۰۹۵۷ - ۴۴۸۴ / ۲۶ / ۱۴ / ۱۴۵۱۰۳. Epub and ۲۰۱۵ Mar lated serum serum human (): the the of lander، E۱ S، of or or or،،،،، University، widely،، ۴۸،،،، is is is poly is is - systems - Technology for). با این حال، کمی سازی گستره pegylation همچنان چالش برانگیز است. علاوه بر این، تاثیر مشتقات مختلف PEG که معمولا برای conjugation نانوذره استفاده می‌شوند تاکنون مورد بررسی قرار نگرفته است. هدف از این مطالعه، توسعه روشی برای تعیین quantification و نظارت بر تاثیر مواد PEG مختلف بر میزان of مرتبط با سطح نانو ذره HSA است. روش کروماتوگرافی حذفی با اندازه با تشخیص شاخص شکست ایجاد شد که باعث به وجود آمدن PEG مواد اولیه در مایع رویی شد. نتایج به‌دست‌آمده با استفاده از یک مشتق PEG فلورسنت که توسط photometry و fluorimetry تشخیص داده شد، تایید شدند. به علاوه، نانوذرات pegylated HSA به روش آنزیمی مورد هضم آنزیمی قرار گرفتند و میزان اتصال of فعال fluorescently به طور مستقیم تعیین گردید. تمامی روش‌های تحلیلی تایید کردند که تحت شرایط بهینه pegylation، بازده pegylation تا ۵ / ۰ میلی‌گرم در هر ذره ممکن است به دست آید. محاسبات مدل ساختار مولکولی زنجیره‌های PEG را در سطح ذرات بسیار محتمل می‌سازد. با انکوبه کردن نانو ذرات با سرم جنین گاوی، جذب سطحی پروتئین‌های سرم در نانو ذرات pegylated HSA در مقایسه با نانوذرات non - با استفاده از الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید الکتروفورز شد. در نهایت، اثر مثبت of بر روی نیمه عمر پلاسما در مطالعه in vivo در موش‌ها نشان‌داده شده‌است. در مقایسه با نانوذرات اصلاح‌نشده، pegylation منجر به چهار برابر بزرگ‌تر شدن سطح پلاسمایی شد: ۲۵۷۸۹۵۴۴ / ۰۹۵۷ - ۴۴۸۴ / ۲۶ - ۴۴۸۴ / ۲۶ / ۱۴۵۱۰۳ [ Indexed برای MEDLINE ]، SubstancesMeSH termsAnimalsCattleHumansMiceNanoparticles / chemistry *، Serum Albumin / chemistry *، Bovine / chemistrySurface PropertiesSubstancesSerum، BovinePolyethylene GlycolsLinkOut - more Text، Publishing GlycolsLinkOut - more resourcesFull - resourcesFull SourcesIOP - resourcesFull SourcesIOP.

ترجمه شده با

Download PDF سفارش ترجمه این مقاله این مقاله را خودتان با کمک ترجمه کنید
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.