view in publisher's site

Gene cloning, structural gene and promoter identification, and active assay of the phosphatidylcholine synthase of Pseudomonas sp. strain 593

Pseudomonas sp. strain 593, a soil bacterium, is able to use exogenous choline to synthesize phosphatidylcholine via phosphatidylcholine synthase (Pcs). A 2020 bp DNA fragment that hybridized to a Pcs probe was cloned. This fragment contained a large open reading frame (ORF) with two potential ATG start sites that would encode for 293 and 231 amino acid proteins. Fragments containing the two ORFs encoded Pcs when they were inserted into the expression vector pET23a and expressed under the control of the T7 promoter in Escherichia coli BL21(DE3) pLysS. However, when the two ORFs were inserted into the cloning vector pMD18-T and expressed without control of the plasmid promoter in E. coli DH5α, only the larger clone exhibited Pcs activity. This suggested that the larger fragment contained a native promoter driving expression of the smaller ORF. A promoter activity assay, in which DNA fragments were inserted into the promoter-probe plasmid pCB182 and β-galactosidase activity of E. coli transformants was tested, demonstrated that a promoter is indeed present in the DNA region. All results together indicate that the 696 bp ORF, not the larger 897 bp ORF, encodes the Pcs in Pseudomonas sp. strain 593 and carries a promoter in front of its 5′ terminus.

ژن شبیه‌سازی ژن، ژن ساختاری و تشخیص پروموتور، و سنجش فعال of های سودوموناس sp. کرنش ۵۹۳

< jats: p > sp. strain ۵۹۳، یک باکتری خاک، توانایی استفاده از choline exogenous را برای ترکیب phosphatidylcholine از طریق phosphatidylcholine synthase (pcs)دارد. قطعه DNA bp که به پروب pcs هیبرید پیدا کرد، همانندسازی شد. این قطعه حاوی یک چارچوب مطالعه باز بزرگ (ORF)با دو سایت آغاز کننده پتانسیل است که برای ۲۹۳ و ۲۳۱ آمینو اسیدها را رمز گشایی می‌کند. قطعات حاوی دو ORFs encoded کدگذاری شده در زمانی که وارد سیستم vector expression شدند و تحت کنترل تقویت‌کننده T۷ در Escherichia کولی bl۲۱ (de۳)بیان شدند. با این حال، هنگامی که دو ORFs به بردار شبیه‌سازی pMD۱۸ - T وارد شدند و بدون کنترل پروموتور پلاسمید در E بیان شدند. coli DH۵α نشان نداد، تنها the بزرگ‌تر فعالیت pcs را نشان داد. این موضوع نشان داد که یک قطعه بزرگ‌تر حاوی بیان محرک محرک اصلی the کوچک‌تر بود. سنجش فعالیت تقویت‌کننده، که در آن قطعات DNA به پلاسمید probe promoter pCB۱۸۲ و فعالیت β - galactosidase E وارد می‌شوند. coli tested تست شد، اثبات کرد که یک تقویت‌کننده در واقع در منطقه DNA وجود دارد. همه نتایج با هم نشان می‌دهند که the bp ORF، نه the bp larger، the in های سودوموناس را رمزگذاری می‌کند. شکل ۵۹۳ را فشار داده و یک تقویت‌کننده را در مقابل پایانه ۵ اینچی خود حمل می‌کند. < / jats: p >
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Molecular Biology
  • ترجمه مقاله Molecular Biology
  • مقاله زیست‌شناسی مولکولی
  • ترجمه مقاله زیست‌شناسی مولکولی
  • مقاله General Medicine
  • ترجمه مقاله General Medicine
  • مقاله طب عمومی
  • ترجمه مقاله طب عمومی
  • مقاله Genetics
  • ترجمه مقاله Genetics
  • مقاله ژنتیک
  • ترجمه مقاله ژنتیک
  • مقاله Microbiology
  • ترجمه مقاله Microbiology
  • مقاله میکروبیولوژی
  • ترجمه مقاله میکروبیولوژی
  • مقاله Applied Microbiology and Biotechnology
  • ترجمه مقاله Applied Microbiology and Biotechnology
  • مقاله میکروبیولوژی و بیوتکنولوژی کاربردی
  • ترجمه مقاله میکروبیولوژی و بیوتکنولوژی کاربردی
  • مقاله Immunology
  • ترجمه مقاله Immunology
  • مقاله ایمنی‌شناسی
  • ترجمه مقاله ایمنی‌شناسی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.