view in publisher's site

Simplified Detection of a Mutation Causing Familial Hypercholesterolaemia Throughout Britain: Evidence for an Origin in a Common Distant Ancestor

Familial hypercholesterolaemia (FH) is an inherited autosomal codominant disorder caused by many different mutations in the low-density lipoprotein receptor (LDLR) gene. The one described most frequently in patients with FH from England, arises from a G→A transition at the first nucleotide of codon 80, resulting in the substitution of lysine for glutamic acid at residue 80 of the mature protein, FH E80K.We describe a simple method to detect this mutation in genomic DNA using the polymerase chain reaction (PCR). A 69 base pair (bp) fragment of exon 3 of the LDLR gene is amplified using a mutagenic upstream PCR primer. This substitutes a T for an A residue in the amplified product, 2 bp upstream from the mutant site, generating a restriction site for the endonuclease Taq I, in normal, but not in mutant DNA. Following digestion of amplified DNA with Taq I, normal but not mutant DNA is cut into two fragments of 29 and 40 bp, which are readily identified by polyacrylamide gel electrophoresis.Using this method, 410 patients with clinically diagnosed FH, attending lipid clinics in Edinburgh (72), Newport (158), Walsall (30) and Southampton (150), were screened for the mutation. Five individuals tested positive as heterozygotes, one from Edinburgh, three from Newport and one from Southampton. This finding was confirmed by DNA sequence analysis. We conclude that FH due to this mutation occurs in individuals throughout Great Britain and that it can be detected acccurately using this simple technique.DNA from these and other individuals previously identified to be heterozygous for FH E80K, was then studied using PCR of highly informative microsatellite markers flanking the LDLR gene. Sixteen of 17 apparently unrelated individuals heterozygous for FH E80K also were heterozygous for an identical size (239 nucleotide) allele, of polymorphic microsatellite D19S394, located approximately 250 kb away from the LDLR gene. This supports the hypothesis that FH E80K in these 16 individuals arose from a single ancestor less than 1000 years ago.

تشخیص ساده شده یک Mutation Causing Familial در سراسر بریتانیا: شواهدی برای منشا در یک Ancestor دوردست مشترک

Familial hypercholesterolaemia (FH)یک اختلال ارثی اتوزومال مغلوب است که از سوی بسیاری از جهش‌های مختلف در ژن گیرنده لیپوپروتئین با دانسیته پایین (ldlr)ایجاد می‌شود. این یک روش ساده برای تشخیص این جهش در DNA ژنومی با استفاده از واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR)است. قطعه ۶۹ جفت باز (bp)از اگزون ۳ ژن ldlr با استفاده از یک پرایمر PCR جهش زا تکثیر می‌شود. این جایگزین یک T برای یک باقیمانده در محصول تکثیر شده، ۲ جفت باز در بالا دست از سایت جهش‌یافته، ایجاد یک مکان محدودکننده برای the Taq I، در حالت عادی، اما نه در DNA جهش‌یافته را ایجاد می‌کند. پس از هضم DNA تکثیر شده با Taq I، نرمال اما نه جهش دی ان به دو قطعه از ۲۹ و ۴۰ جفت بازی تقسیم می‌شود که به آسانی توسط ژل پلی آکریل آمید شناسایی می‌شود. پنج نفر به عنوان هتروزیگوت ها، یکی از ادینبورگ، سه نفر از Newport و یکی از Southampton، آزمایش شدند. این یافته توسط آنالیز توالی DNA تایید شد. ما نتیجه می‌گیریم که FH ناشی از این جهش در افراد سراسر بریتانیا رخ می‌دهد و با استفاده از این جهش ساده از این ها و سایر افراد که قبلا شناسایی شده‌اند برای FH E۸۰K تشخیص داده شد، سپس با استفاده از PCR نشانگر ریزماهواره های بسیار آموزنده در کنار ژن ldlr بررسی شد. شانزده تای دیگر از ۱۷ فرد به ظاهر نامرتبط برای FH E۸۰K نیز برای یک آلل مشابه (۲۳۹ nucleotide)به صورت هتروزیگوت بودند، از نشانگرهای ریزماهواره پلی مورفیک D۱۹S۳۹۴ که در حدود ۲۵۰ kb از ژن ldlr فاصله داشت. این فرضیه را تایید می‌کند که FH E۸۰K در این ۱۶ فرد از یک جد واحد کم‌تر از ۱۰۰۰ سال پیش بوجود آمده‌است.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله General Medicine
  • ترجمه مقاله General Medicine
  • مقاله طب عمومی
  • ترجمه مقاله طب عمومی
  • مقاله Clinical Biochemistry
  • ترجمه مقاله Clinical Biochemistry
  • مقاله بیوشیمی بالینی
  • ترجمه مقاله بیوشیمی بالینی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.