view in publisher's site

Activation of Latent Human GDF9 by a Single Residue Change (Gly391Arg) in the Mature Domain

Growth differentiation factor 9 (GDF9) controls granulosa cell growth and differentiation during early ovarian folliculogenesis and regulates cumulus cell function and ovulation rate in the later stages of this process. Similar to other TGF-β superfamily ligands, GDF9 is secreted from the oocyte in a noncovalent complex with its prodomain. In this study, we show that prodomain interactions differentially regulate the activity of GDF9 across species, such that murine (m) GDF9 is secreted in an active form, whereas human (h) GDF9 is latent. To understand this distinction, we used site-directed mutagenesis to introduce nonconserved mGDF9 residues into the pro- and mature domains of hGDF9. Activity-based screens of the resultant mutants indicated that a single mature domain residue (Gly391) confers latency to hGDF9. Gly391 forms part of the type I receptor binding site on hGDF9, and this residue is present in all species except mouse, rat, hamster, galago, and possum, in which it is substituted with an arginine. In an adrenocortical cell luciferase assay, hGDF9 (Gly391Arg) had similar activity to mGDF9 (EC50 55 ng/ml vs. 28 ng/ml, respectively), whereas wild-type hGDF9 was inactive. hGDF9 (Gly391Arg) was also a potent stimulator of murine granulosa cell proliferation (EC50 52 ng/ml). An arginine at position 391 increases the affinity of GDF9 for its signaling receptors, enabling it to be secreted in an active form. This important species difference in the activation status of GDF9 may contribute to the variation observed in follicular development, ovulation rate, and fecundity between mammals.

فعال‌سازی GDF۹ انسانی به‌تعویق‌افتاده با تغییر تک محل سکونت (Gly۳۹۱Arg)در حوزه ویژگی

مقدمه: فاکتور تمایز رشد القایی (GDF۹)۹ رشد و تمایز سلول‌های گرانولوزا را در طی فولیکولوژنز اولیه تخمدان کنترل می‌کند و عملکرد سلول‌های کومولوس و نرخ تخمک‌گذاری را در مراحل بعدی این فرآیند تنظیم می‌کند. مشابه با سایر لیگاندهای سوپرخانواده TGF - β، GDF۹ از اووسیت در یک کمپلکس غیر کووالانسی با پرودومن خود ترشح می‌شود. در این مطالعه، ما نشان می‌دهیم که تعاملات پرودومن به طور متفاوت فعالیت GDF۹ را در گونه‌های مختلف تنظیم می‌کند، به طوری که مورین (m)GDF۹ به شکل فعال ترشح می‌شود، در حالی که انسان (h)GDF۹ نهفته است. برای درک این تمایز، ما از جهش زایی در محل برای معرفی باقی مانده‌های mGDF۹ محافظت نشده در دامنه‌های پروو بالغ hGDF۹ استفاده کردیم. صفحات مبتنی بر فعالیت جهش‌یافته‌های حاصل نشان داد که یک باقیمانده دامنه کامل (Gly۳۹۱)، تاخیر را در hGDF۹ ایجاد می‌کند. Gly۳۹۱ بخشی از سایت اتصال گیرنده نوع ۱ روی hGDF۹ را شکل می‌دهد و این پسماند در همه گونه‌ها به جز موش، موش، همستر، گالگو و پوسوم وجود دارد که در آن با یک آرژینین جایگزین می‌شود. در سنجش لوسیفراز سلول آدرنوکورتیکال، hGDF۹ (Gly۳۹۱Arg)فعالیت مشابهی با mGDF۹ (EC۵۰ ۵۵ ng / ml vs. ۲۸ ng / ml)، در حالی که hGDF۹ نوع وحشی غیر فعال بود. hGDF۹ (Gly۳۹۱Arg)نیز یک محرک قوی برای تکثیر سلول گرانولوزای موش (EC۵۰ ۵۲ ng / ml)بود. یک آرژینین در موقعیت ۳۹۱ میل ترکیبی GDF۹ را به خاطر گیرنده‌های علامت دهی آن افزایش می‌دهد و آن را قادر می‌سازد که به شکل فعالی ترشح شود. این تفاوت گونه‌های مهم در وضعیت فعالسازی GDF۹ ممکن است به تنوع مشاهده‌شده در رشد فولیکولی، نرخ تخمک‌گذاری و باروری بین پستانداران کمک کند. CNN / jats: p.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Endocrinology
  • ترجمه مقاله Endocrinology
  • مقاله درون‌ریزشناسی
  • ترجمه مقاله درون‌ریزشناسی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

95/12/18 - با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس و کروم٬ چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.