view in publisher's site

Detection and quantification of viable Bacillus cereus group species in milk by propidium monoazide quantitative real-time PCR

The Bacillus cereus group includes important spore-forming bacteria that present spoilage capability and may cause foodborne diseases. These microorganisms are traditionally evaluated in food using culturing methods, which can be laborious and time-consuming, and may also fail to detect bacteria in a viable but nonculturable state. The purpose of this study was to develop a quantitative real-time PCR (qPCR) combined with a propidium monoazide (PMA) treatment to analyze the contamination of UHT milk by B. cereus group species viable cells. Thirty micrograms per milliliter of PMA was shown to be the most effective concentration for reducing the PCR amplification of extracellular DNA and DNA from dead cells. The quantification limit of the PMA-qPCR assay was 7.5 × 102 cfu/mL of milk. One hundred thirty-five UHT milk samples were analyzed to evaluate the association of PMA to qPCR to selectively detect viable cells. The PMA-qPCR was able to detect B. cereus group species in 44 samples (32.6%), whereas qPCR without PMA detected 78 positive samples (57.8%). Therefore, the PMA probably inhibited the amplification of DNA from cells that were killed during UHT processing, which avoided an overestimation of bacterial cells when using qPCR and, thus, did not overvalue potential health risks. A culture-based method was also used to detect and quantify B. cereus sensu stricto in the same samples and showed positive results in 15 (11.1%) samples. The culture method and PMA-qPCR allowed the detection of B. cereus sensu stricto in quantities compatible with the infective dose required to cause foodborne disease in 3 samples, indicating that, depending on the storage conditions, even after UHT treatment, infective doses may be reached in ready-to-consume products.

تشخیص و تعیین کمیت گونه‌های گروه باسیلوس سرئوس زنده در شیر با استفاده از PCR کمی زمان واقعی پروپیودیوم مونوآزید

گروه باسیلوس سرئوس شامل باکتری‌های مهم اسپور ساز است که قابلیت فساد را نشان می‌دهند و ممکن است باعث بیماری‌های ناشی از غذا شوند. این میکرو ارگانیسم‌ها به طور سنتی در مواد غذایی با استفاده از روش‌های کشت مورد ارزیابی قرار می‌گیرند که می‌تواند کاری دشوار و وقت گیر باشد و همچنین ممکن است نتوانند باکتری را در یک حالت پایدار اما غیرقابل کشت تشخیص دهند. هدف از این مطالعه، توسعه یک روش کمی real - time PCR (qPCR)همراه با یک تیمار پروپیدیوم مونوآزید (PMA)برای تجزیه و تحلیل آلودگی شیر UHT توسط B. گروه cereus، سلول‌های زنده را از خود نشان دادند. ۳۰ میکروگرم بر میلی‌لیتر PMA موثرترین غلظت برای کاهش تکثیر PCR DNA خارج سلولی و DNA از سلول‌های مرده بود. حد تعیین روش PMA - qPCR برابر با cfu / ml ۷.۵ * ۱۰۲ بود. یکصد و سی و پنج نمونه شیر UHT برای ارزیابی ارتباط PMA با qPCR برای تشخیص سلول‌های زنده به صورت انتخابی آنالیز شدند. PMA - qPCR توانست B. در حالی که qPCR بدون PMA در ۷۸ مورد (۵۷.۸ %)مثبت بود. بنابراین، PMA احتمالا تکثیر DNA از سلول‌هایی که در طول پردازش UHT کشته شدند را مهار کرد، که از برآورد بیش از حد سلول‌های باکتریایی در هنگام استفاده از qPCR اجتناب کرد و در نتیجه خطرات بالقوه سلامتی را بیش از حد ارزش‌گذاری نکرد. یک روش مبتنی بر فرهنگ نیز برای تشخیص و تعیین کمیت B استفاده شد. در ۱۵ مورد (۱۱.۱ درصد)نتیجه مثبت بود. روش کشت و PMA - qPCR تشخیص B. با توجه به میزان آلودگی مورد نیاز برای ایجاد بیماری ناشی از غذا در سه نمونه، می توان نتیجه گرفت که بسته به شرایط نگهداری، حتی پس از درمان با UHT، میزان آلودگی در محصولات آماده مصرف نیز ممکن است افزایش یابد.
ترجمه شده با


پر ارجاع‌ترین مقالات مرتبط:

  • مقاله Genetics
  • ترجمه مقاله Genetics
  • مقاله ژنتیک
  • ترجمه مقاله ژنتیک
  • مقاله Animal Science and Zoology
  • ترجمه مقاله Animal Science and Zoology
  • مقاله علوم حیوانات و جانورشناسی
  • ترجمه مقاله علوم حیوانات و جانورشناسی
  • مقاله Food Science
  • ترجمه مقاله Food Science
  • مقاله علوم غذایی
  • ترجمه مقاله علوم غذایی
سفارش ترجمه مقاله و کتاب - شروع کنید

با استفاده از افزونه دانلود فایرفاکس چکیده مقالات به صورت خودکار تشخیص داده شده و دکمه دانلود فری‌پیپر در صفحه چکیده نمایش داده می شود.